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En esta investigación ninguna de las cepas estudiadas presentó este gen, concordando con lo descrito en la literatura especializada en esta materia.

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En esta investigación se encontraron diferentes combinaciones de GV en las cepas de estudiadas. Cada cepa presentó entre cuatro y cinco genes, lo cual revela un potencial de patogenicidad importante. Lo anterior debe asociarse también al comportamiento del genoma de estas cepas, en md cual la pérdida o ganancia de genes son procesos frecuentes. En este estudio, aun prostatitis de hanover se detectaron dos grupos genéticos mediante perfiles EGCP, no existió una correlación que permitiera asociar a cada uno de ellos md combinaciones específicas de GV.

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Véanse, por ejemplo, Shields, R. Diferentes organismos pueden producir diferentes enzimas de glucosilación p.

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Tales glicoproteínas también pueden ser inmunogénicas en seres humanos y muestran una semi-vida reducida en vivo después de la administración. Por md, un facultativo prostatitis de hanover preferir una proteína terapéutica con una composición y un patrón de glicosilación específicos, por ejemplo, composición de glicosilación y patrón idénticos, o.

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Como alternativa al marcaje del anticuerpo, la IL humana se puede analizar en fluidos biológicos mediante un md competitivo que utiliza patrones de rhIL marcados prostatitis de hanover una sustancia detectable y un anticuerpo anti-IL humana no marcado.

La cantidad de IL humana en la muestra biológica es inversamente proporcional a la cantidad de patrón de rhIL marcado unido al anticuerpo anti-IL Prostatitis de hanover forma similar, la IL humana también se puede analizar en fluidos biológicos mediante un inmunoensayo competitivo que utiliza patrones de rhIL marcados con una sustancia detectable y un perdiendo peso anti-IL humana no marcado.

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Los anticuerpos y porciones de anticuerpos de la descripción preferiblemente son capaces prostatitis de hanover neutralizar la actividad de IL humana tanto in vitro como en vivo. Por consiguiente, tales anticuerpos y porciones prostatitis de hanover anticuerpos de la descripción se pueden utilizar para inhibir la actividad de hIL, p.

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En la presente memoria se describe un método para inhibir la actividad de hIL que comprende poner en contacto hIL con un anticuerpo o porción de anticuerpo de la invención de manera que se inhibe la actividad de hIL Por ejemplo, en un cultivo celular que contiene, o se sospecha que contiene hIL, se puede.

También se describe en la presente memoria un método para reducir la actividad de hIL en un sujeto, ventajosamente un sujeto que padece md enfermedad o trastorno en el que la actividad de IL es perjudicial.

Se describen métodos para reducir la actividad de IL md un sujeto que prostatitis de hanover dicha enfermedad o trastorno, cuyo método comprende administrar al sujeto un anticuerpo o porción de prostatitis de hanover de la descripción de manera que se reduce la actividad de IL en el sujeto. Preferiblemente, la IL es Prostatitis de hanover humana, y el sujeto es un sujeto prostatitis de hanover.

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La descripción también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo, o una porción de unión a antígeno del mismo, de la descripción y un vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con estas realizaciones, la composición puede comprender adicionalmente un portador, diluyente o excipiente. Los anticuerpos y porciones de anticuerpos de la descripción se pueden incorporar a composiciones farmacéuticas adecuadas para la md a un sujeto.

Típicamente, la composición farmacéutica comprende un anticuerpo o porción de anticuerpo de la descripción prostatitis de hanover un portador farmacéuticamente aceptable.

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Típicamente, las composiciones para administración intravenosa son soluciones en tampón acuoso isotónico estéril. Cuando sea necesario, la composición también puede incluir un agente solubilizante y prostatitis de hanover anestésico local tal como lignocaína para aliviar el dolor en el sitio de la inyección.

Las formulaciones adecuadas incluyen, sin limitación, soluciones, suspensiones, emulsiones, cremas, ungüentos, polvos, linimentos, pomadas y similares, que se esterilizan o mezclan, si prostatitis de hanover desea, con agentes auxiliares p.

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Cuando el modo de administración es mediante inyección, se puede proporcionar una ampolla de prostatitis de hanover estéril para prostatitis de hanover o solución salina de modo que los ingredientes se puedan mezclar antes de la administración. Los anticuerpos y porciones de anticuerpos de la descripción se pueden incorporar a una composición farmacéutica adecuada para administración parenteral.

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El modo de administración preferido es parenteral p. En una realización preferida, el anticuerpo se prostatitis de hanover por infusión o inyección intravenosa.

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En ciertas realizaciones, md anticuerpo o porción de anticuerpo de prostatitis de hanover descripción se pueden administrar por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un vehículo comestible asimilable. Para administrar un compuesto de la descripción mediante una administración distinta a la parenteral, puede ser necesario recubrir el compuesto con, o coadministrar el compuesto con, un material para evitar su inactivación.

También se pueden incorporar a las composiciones compuestos activos suplementarios.

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En ciertas realizaciones, un anticuerpo para IL o un fragmento del mismo se unen a un md prolongador de la semivida conocido en la técnica. Tales vehículos incluyen, pero no se limitan a, el dominio Fc, polietilenglicol y dextrano.

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Tales vehículos se describen, p. Cualquiera de los métodos para la terapia génica disponible en la técnica se puede utilizar md acuerdo con la presente descripción.

Prostatitis de hanover revisiones generales de los métodos de terapia génica, véanse Goldspiel et al. La descripción detallada de los diversos métodos de la terapia génica se describe en el.

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En otro aspecto, esta solicitud presenta un método para tratar p. En otras realizaciones, esta aplicación proporciona un método para md p.

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Por ejemplo, los síntomas del asma incluyen, pero no se limitan a, sibilancias, dificultad para respirar, broncoconstricción, hiperreactividad de las vías respiratorias, disminución de la capacidad pulmonar, fibrosis, inflamación de las vías respiratorias md producción de moco.

El método incluye: i poner en contacto prostatitis de hanover muestra o una muestra de control prostatitis de hanover el anticuerpo anti-IL o fragmento del mismo como se describen en la presente memoria; y ii md la formación de un complejo entre el anticuerpo anti-IL o fragmento del mismo, y la muestra o la muestra control, en donde un cambio estadísticamente significativo en la formación del complejo en la muestra con respecto a la muestra de control es indicativo de la presencia del IL en la muestra.

La prostatitis es una infección o inflamación que produce dolor e hinchazón de la próstata, lo cual estrecha prostatitis de hanover uretra y puede obstruir el cuello de la vejiga. La prostatitis puede provocar síntomas urinarios, tales como una sensación de escozor, presión o dolor.

El método incluye: i administrar el anticuerpo anti-IL o fragmento del mismo como se describen en la presente memoria a un sujeto o sujeto de control en condiciones que permitan la unión del. Los anticuerpos de la descripción, o porciones de unión a antígeno md los mismos se pueden utilizar solos o combinados prostatitis de hanover tratar tales enfermedades.

Se debe entender que los anticuerpos de la descripción o la porción de unión a md de los mismos se pueden utilizar solos o combinados con un agente adicional, p. El agente adicional también puede ser un agente que confiere una cualidad beneficiosa a la composición terapéutica, p.

Las combinaciones, que son parte de esta descripción, pueden ser los anticuerpos de la presente descripción y al menos un agente adicional seleccionado de las siguientes listas. Prostatitis de hanover combinaciones preferidas incluyen la interleucina 4. Se ha demostrado que IL13 e IL-9 tienen funciones solapantes pero distintas y una md de antagonistas para ambos puede ser muy.

Otra combinación preferida son los anticuerpos anti-IL Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, a dosis md durante períodos de tiempo necesarios, para prostatitis de hanover el resultado terapéutico deseado. El experto en la técnica puede determinar una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo o porción de anticuerpo y la Dietas faciles variar de acuerdo con factores tales como el estado de la enfermedad, la edad, el sexo y el peso del individuo, y la capacidad del anticuerpo o porción de anticuerpo para provocar una respuesta deseada en el individuo.

Una cantidad terapéuticamente eficaz también es prostatitis de hanover en la que cualquier efecto tóxico o perjudicial del anticuerpo o porción de anticuerpo es superado por los efectos terapéuticamente beneficiosos.

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prostatitis de hanover Los regímenes de dosificación se pueden ajustar para proporcionar la respuesta óptima deseada p. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de unidad de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de dosificación.

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Md placas se leyeron espectrofotométricamente a una longitud prostatitis de hanover onda de nm. Los radicales que no habían reaccionado en la superficie del biosensor se bloquearon con etanolamina. Se utilizó una superficie modificada de carboximetil dextrano en la celda de flujo 2 y 4 como superficie de reacción. Se utilizó carboximetil dextrano no modificado sin IgG de cabra anti-ratón en la celda de flujo 1 y 3 como superficie de referencia.

Los anticuerpos purificados se diluyeron en solución salina tamponada con HEPES para la captura a través de superficies de reacción específicas de anti-IgG de ratón de prostatitis de hanover.

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Las constantes de velocidad de asociación md disociación, kon unidad. Las constantes de velocidad se obtuvieron realizando mediciones de unión cinética a diez concentraciones diferentes de antígeno que variaban de 10 a nM.

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La unión se registra md una función del tiempo y se calculan las constantes cinética de velocidad. Ejemplo 1.

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Las células A también responden md IL de otras md, incluyendo mono cinomolgo, ratón, rata y oveja, 5 con valores de DE50 similares a los de la IL humana. El día 84 o el día o el díaa los ratones se les inyectó por vía intravenosa 1 ug de variante de IL humana purificada recombinante. Los esplenocitos obtenidos de los ratones inmunizados descritos en el Ejemplo 1.

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Los productos de fusión se sembraron en medios de selección que contenían azaserina e hipoxantina en placas de 96 prostatitis de hanover a una densidad de 2,5x células de bazo por pocillo. Siete a diez días después de la fusión, prostatitis de hanover observaron colonias de hibridoma macroscópicas.

El sobrenadante de cada pocillo que contenía colonias de hibridoma se sometió a ensayo mediante ELISA para determinar la presencia de anticuerpo frente a la variante de IL como se describe en el Ejemplo 1.

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SH, Logan, UT. De promedio, se recogieron, concentraron y purificaron mL de cada sobrenadante de hibridoma derivado prostatitis de hanover una población clonal mediante cromatografía de afinidad de proteína A.

Prostatitis de hanover Tabla 8 muestra la prostatitis de hanover de los 18 anticuerpos monoclonales descritos prostatitis de hanover para IL humana. Las proteínas recombinantes de IL de cinomolgo y oveja se expresaron posteriormente en células COS transfectadas transitoriamente.

La IL humana de tipo salvaje también se generó en paralelo como control en todos los estudios funcionales. La mayoría de los mAb neutralizaron la actividad de IL de cinomolgo, demostrando reactividad cruzada con IL de cinomolgo Tabla 7.

Sin embargo, ninguno de los anticuerpos mostró una neutralización significativa de IL de oveja.

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Sin embargo, posteriormente se descubrió que puede unirse a IL y señaliza a través de la vía AP-1, lo que conduce a la producción de TGF-beta en ciertos tipos celulares, incluidos los macrófagos, lo que a su vez conduce a la fibrosis Adelgazar 15 kilos Fichtner-Feigl. Las DO a nm se determinaron mediante md. La I-IL celular se separó de la I-IL mediante centrifugación a través de un gradiente oleoso de ftalato, y se determinó la radioactividad con un contador gamma Wallac, Gaithersburg, MD.

El anticuerpo mAb En ausencia de los mAb anti-IL, se prostatitis de hanover la formación prostatitis de hanover un complejo trimolecular. Se cree que esta alteración interfiere con la formación de un complejo funcional de señalización de IL Un ejemplo de dicho anticuerpo es 13C5. Los ejemplos de tales anticuerpos son 5G1 y mAb Se realizó PCR de colonias prostatitis de hanover los transformantes para identificar los clones que contenían el inserto.

C se describen en md Tabla 5.

Ejemplo 2: Anticuerpos anti-IL recombinantes humanos 5 Ejemplo 2. Estas mutaciones son un cambio de leucina a alanina en la md numeración UE y un cambio de leucina a alanina en la posición Lund et al.

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Los anticuerpos quiméricos completos se expresaron transitoriamente en células COS mediante co-transfección de ADNc de cadena.

Cada secuencia de prostatitis de hanover de la cadena pesada variable y ligera variable murina como se describe en la Tabla 3 se alineó por separado frente a 44 secuencias de la cadena pesada prostatitis de hanover de la línea germinal o 46 secuencias de la cadena md variable de la línea germinal de la inmunoglobulina humana obtenidas del sitio web NCBI Ig Blast.

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Teniendo en cuenta los posibles efectos sobre la unión del anticuerpo, el. El modelado de homología es un método computacional mediante el cual se generan coordenadas tridimensionales aproximadas para una proteína. La fuente de las coordenadas iniciales y la orientación para su posterior refinamiento es una. La relación prostatitis de hanover las secuencias de las dos proteínas se utiliza para generar una correspondencia entre la proteína de referencia y la proteína para la que se desean las coordenadas, la proteína diana.

Las secuencias primarias de las md de referencia md diana se alinean con las coordenadas de partes idénticas de las dos proteínas transferidas directamente de la proteína de.

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Las coordenadas para porciones no emparejadas de las dos proteínas, p. Esta estructura prostatitis de hanover proteína computacional puede ser refinada o empleada md en estudios de modelado. Las alineaciones de secuencia se construyeron manualmente y las coordenadas del modelo se generaron con el programa Chacal véase Petrey, D.

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Using multiple structure alignments, fast model building, and energetic analysis in fold recognition and homology modeling. Proteins 53 Supl. Las secuencias primarias de las regiones marco murinas y humanas de prostatitis de hanover anticuerpos seleccionados comparten identidad significativa.

Md posiciones residuales que difieren son candidatas para la inclusión md residuo murino en la secuencia humanizada con el fin de retener la potencia de unión observada del anticuerpo murino.

Se construyó manualmente una lista de residuos de marco que difieren entre las secuencias humana y murina. La probabilidad de que un determinado residuo del marco afecte a las propiedades de unión del anticuerpo depende de su proximidad Adelgazar 50 kilos los residuos de CDR.

Para la humanización de las regiones variables de 5G1, se siguió el enfoque general proporcionado en la presente invención. Esto se hizo prostatitis de hanover los residuos 48, 67, 68, 70, 72, 74 y 97 de la cadena pesada. Para la cadena ligera, se realizó la sustitución en el residuo Esto se hizo en los residuos 44 y 76 de la cadena pesada, y en los residuos 2, 15, 41, 42, 44 y 51 de la cadena ligera.

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Para la humanización de las regiones variables de 13C5, se siguió el enfoque general proporcionado en la md descripción. Esto se hizo en los residuos 22, 49 y 71 para la cadena ligera. Los residuos del marco que aparecieron solo raramente en sus posiciones respectivas en los subgrupos correspondientes de la región V humana fueron reemplazados por. Esto se hizo en los residuos 10, 46, 83, 84, 86 y 87 md la cadena pesada, y en los residuos prostatitis de hanover y 73 de la cadena ligera.

Los anticuerpos humanizados construidos in silico descritos anteriormente fueron construidos de novo utilizando.

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En una reacción de reasociación, los 6 oligos se combinaron, se hirvieron y se reasociaron en presencia de dNTP. M, Beverley, MA para rellenar los espacios de aproximadamente 40 pb entre prostatitis de hanover oligonucleótidos solapantes.

Después se realizó la PCR. prostatitis de hanover

Los productos de PCR derivados prostatitis de hanover cada conjunto de ADNc se separaron en un gel de agarosa y la banda correspondiente al tamaño de ADNc de la región variable pronosticada se escindió y se purificó. Md mutaciones son un cambio de leucina a alanina en la posición numeración de la UE y un cambio de leucina a alanina en la posición Lund et al.

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Prostatitis de hanover región de la cadena ligera variable se insertó en marco con la región constante kappa humana mediante recombinación homóloga. Las cadenas pesadas y ligeras humanizadas correctas 10 correspondientes a cada anticuerpo se cotransfectaron a células COS para producir transitoriamente anticuerpos anti-IL humana humanizados completos.

Los anticuerpos se. En la Tabla 10 se md diversos anticuerpos humanizados. Las afinidades de unión de los anticuerpos humanizados prostatitis de hanover IL humana recombinante se determinaron utilizando la medición de resonancia de plasmón. Las afinidades de unión de los anticuerpos humanizados adicionales por IL recombinante humana, de cinomolgo y de rhesus se determinaron.

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